2 सीरम प्रोटीन के वैद्युतकणसंचलन के तरीके (चित्रा के साथ)

सीरम में कई प्रोटीन होते हैं। 1937 में, Arne W Tiselius ने एक विद्युत क्षेत्र में विभिन्न प्रोटीनों को अलग करने की विधि पेश की।

इलेक्ट्रोफोरेसिस में, प्रोटीन एक विद्युत क्षेत्र में अलग हो जाते हैं। बाद में, कागज या सेलूलोज़ एसीटेट में ज़ोन वैद्युतकणसंचलन विकसित किया गया था। 1952 में, एक दो-चरण विधि विकसित की गई थी जो इम्यूनोप्रिफ़्यूज़न के साथ वैद्युतकणसंचलन को जोड़ती है। बाद में सी विलियम्स, पी ग्रेबर और एम पुल्लिक ने इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस (जिसमें इलेक्ट्रोफोरोसिस और डबल इम्युनोडिफ्यूजन दोनों एक ही अगर-लेपित स्लाइड पर किए जाते हैं) की शास्त्रीय विधि पेश की।

1. जोन वैद्युतकणसंचलन:

प्रोटीन को उनकी सतह के विद्युत आवेशों के आधार पर अलग किया जा सकता है। पृथक्करण के लिए कागज, सेलूलोज़ एसीटेट या अगर जैसे सहायक माध्यम का उपयोग किया जाता है। सीरम का नमूना सहायक माध्यम पर रखा गया है। सहायक माध्यम तब वैद्युतकणसंचलन तंत्र के सकारात्मक और नकारात्मक ध्रुवों से जुड़ा होता है। विद्युत क्षेत्र के तहत, प्रोटीन चार्ज हो जाते हैं और सहायक माध्यम के पार चले जाते हैं। उनका आंदोलन उनके विद्युत आवेश पर निर्भर करता है।

चूंकि विभिन्न प्रोटीन अणुओं के अलग-अलग चार्ज होते हैं, वे सहायक माध्यम में विभिन्न पदों पर चले जाते हैं। आमतौर पर वैद्युतकणसंचलन 60-120 मिनट या उससे अधिक के लिए किया जाता है। फिर प्रोटीन को दाग और जांच की जाती है या एक डेंसिटोमीटर में स्कैन किया जाता है। अलग और सना हुआ प्रोटीन अंशों का डेंसिटोमीटर स्कैनिंग प्रत्येक बैंड को अपने चारित्रिक शिखर में पैटर्न में परिवर्तित करता है और प्रत्येक प्रोटीन अंश के परिमाण में मदद करता है।

2. सीरम प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन:

सामान्य मानव सीरम को पांच प्रमुख वैद्युतकणसंचलन बैंडों में विभाजित किया जाता है: एल्ब्यूमिन, α ₁ -globulin, α ₂ -globulin, and-globulin और y-globulin (Fig। 27.5)।

ज़ोन वैद्युतकणसंचलन कुछ मानव रोगों के निदान में उपयोगी है:

अंजीर 27.5A से C:

सेल्युलोज एसीटेट स्ट्रिप और डेंसिटोमीटर स्कैनिंग ऑन सेलुलोज एसीटेट पेपर स्ट्रिप: ए और ए 1 पर सेल्युलर एसीटेट स्ट्रिप पर सामान्य सीरम प्रोटीन बैंड (ए) और सेल्युलोज एसीटेट स्ट्रिप (ए 1) के डेंसिटोमीटर स्कैनिंग के बाद कल्पना की गई।

बी और बी 1: हाइपरगामेग्लोबुलिनमिया

सी और सी 1: हाइपोगैमाग्लोबुलिनमिया

मैं। मल्टीपल मायलोमा और वाल्डेनस्ट्रॉम के मैक्रो-ग्लोब्युलिनमिया। इन रोगों में, एक इलेक्ट्रोफोरेटिक रूप से प्रतिबंधित प्रोटीन स्पाइक आमतौर पर glo-ग्लोब्युलिन क्षेत्र में होता है। स्पाइक एक मोनोक्लोनल इम्युनोग्लोबुलिन के संचय का प्रतिनिधित्व करता है। मोनोक्लोनल इम्युनोग्लोबुलिन का एक परिभाषित सतह चार्ज होता है, और इसलिए एक स्पाइक का उत्पादन होता है (जबकि, पॉलीक्लोनल इम्युनोग्लोबुलिन का सामान्य पैटर्न वाई-ग्लोब्युलिन क्षेत्र में एक धब्बा पैदा करता है)।

ii। हाइपोगैमाग्लोबुलिनमिया (सीरम गामा ग्लोब्युलिन में कमी)।

iii। हाइपोप्रोटीनेमिया (सभी सीरम प्रोटीन में कमी)।

iv। hypoalbuminemia:

एल्ब्यूमिन में कमी, जो यकृत और गुर्दे की कई बीमारियों में होती है।

v। मूत्र के वैद्युतकणसंचलन में मुफ्त इम्युनोग्लोबुलिन प्रकाश श्रृंखला का पता लगाने में मदद मिलती है, जैसे कि बेंस-जोन्स प्रोटीन।

vi। मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) के ज़ोन वैद्युतकणसंचलन मल्टीपल स्केलेरोसिस और अन्य केंद्रीय तंत्रिका तंत्र विकारों के निदान में मदद करता है। प्रोटीन असामान्यताओं का पता लगाने के लिए सीरम प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन एक स्क्रीनिंग परख के रूप में माना जाता है। विशिष्ट असामान्यताओं को खोजने के लिए आगे के विश्लेषण की आवश्यकता है।