कॉम्बस टेस्ट (एंटीग्लोबुलिन टेस्ट) का नैदानिक प्रासंगिकता
Coombs का परीक्षण एक सरल और सरल तकनीक है। कोम्बस के परीक्षण का पहली बार 1908 में मोरेस्की द्वारा वर्णन किया गया था और बाद में आरआर कोम्ब्स और सहकर्मियों द्वारा 1945 में लाल रक्त कोशिका प्रतिजनों में गैर-एग्लूटिनेटिंग एंटीबॉडी का प्रदर्शन करने के लिए फिर से खोजा गया था।
(एंटीबॉडी को 'गैर-एग्लूटिनेटिंग' एंटीबॉडी कहा जाता है, क्योंकि एंटीबॉडी आरबीसी पर एंटीजन के साथ अपने बंधन के बावजूद, एग्लूटिनेशन का कारण नहीं बन सकते हैं। एंटीबॉडी को कभी-कभी 'अपूर्ण एंटीबॉडी' भी कहा जाता है क्योंकि एंटीबॉडी का कारण नहीं होता है। एग्लूटीनेशन। लेकिन एंटीबॉडी अणु की संरचना में कोई अपूर्णता नहीं है।)
गैर-एग्लूटीटिंग एंटीबॉडीज, वास्तव में, आरबीसी की सतह पर एंटीजन को बांधते हैं। लेकिन आरबीसी का अपेक्षित एग्लूटिनेशन नहीं होता है। जब आरबीसी-बाउंड एंटीबॉडी के खिलाफ एक और एंटीबॉडी (जिसे एंटी-एंटीबॉडी या एंटीग्लोबुलिन कहा जाता है) जोड़ा जाता है, तो एग्लिबिनेशन होता है। एंटीएंटीबॉडी आरबीसी-बाउंड एंटीबॉडी के एफसी क्षेत्रों में बांधते हैं और एक जाली का निर्माण करते हैं, जिससे एग्लूटीनेशन होता है। परीक्षण को एंटीग्लोबुलिन परीक्षण या कॉम्ब्स परीक्षण कहा जाता है।
दो प्रकार के एंटी-ग्लोब्युलिन परीक्षण हैं:
1. प्रत्यक्ष विरोधी ग्लोब्युलिन परीक्षण (DAT)
2. अप्रत्यक्ष एंटी-ग्लोब्युलिन टेस्ट (lAT)
1. प्रत्यक्ष एंटी-ग्लोब्युलिन टेस्ट (डीएटी) का उपयोग एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए किया जाता है, जो विवो में आरबीसी से जुड़ा होता है।
एक रोगी से धोया गया आरबीसी एंटी-ग्लोब्युलिन के साथ मिलाया जाता है।
↓
एंटी-ग्लोब्युलिन आरबीसी की सतह पर गैर-एग्लूटीटिंग एंटीबॉडीज से जुड़ता है और दृश्यमान एग्लूटिनेशन का कारण बनता है। परीक्षा परिणाम DAT पॉजिटिव (चित्र 16.6) है।
इसलिए एक सकारात्मक डीएटी बताता है कि रोगी के आरबीसी गैर-एग्लूटिनेटिंग एंटीबॉडी के साथ लेपित हैं और रोगी को डीएटी पॉजिटिव कहा जाता है।
मैं। नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग के साथ नवजात शिशु के आरबीसी के साथ पॉजिटिव डीएटी होता है (एचडीएन के आरबीसी एंटी-आरएच एंटीबॉडी के साथ लेपित होते हैं)।
ii। वर्तमान में, DAT का उपयोग IgG एंटीबॉडी और C3b RBCs की सतह का पता लगाने के लिए किया जाता है। हेमोलिसिस के साथ पेश होने वाले रोगियों में, डीएटी परीक्षण यह निर्धारित करने में उपयोगी है कि हेमोलिसिस प्रतिरक्षा एटियलजि का है या नहीं।
अंजीर। 16.6: कोम्ब का प्रत्यक्ष एग्लूटिनेशन टेस्ट (DAT)।
आरबीसी की सतह पर बंधे गैर-एग्लूटिनेटिंग एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए डीएटी का उपयोग किया जाता है। A. व्यक्ति की धुली हुई आरबीसी एंटी-ग्लोब्युलिन अभिकर्मक के साथ मिश्रित होती है। एंटी-ग्लोब्युलिन आरबीसी बाध्य एंटीबॉडी के एफसी क्षेत्रों को बांधता है और दिखाई देने वाले एग्लूटीनेशन का कारण बनता है, और व्यक्ति को डीएटी पॉजिटिव कहा जाता है। ख। यदि आरबीसी एंटीबॉडी के साथ लेपित नहीं हैं, तो एग्लूटीनेशन नहीं होगा और व्यक्ति को डीएटी नकारात्मक कहा जाता है। डीएटी का उपयोग नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग से पीड़ित नवजात शिशु के आरएच एंटीबॉडी लेपित आरबीसी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए भी किया जाता है।
मैं। हेमोलिसिस के गैर-प्रतिरक्षात्मक कारण [जैसे कि प्रसार इंट्रावास्कुलर जमावट, लाल कोशिका एंजाइम की कमी [जैसे ग्लूकोज -6-फॉस्फेट डिहाइड्रोजनेज की कमी (G6PD की कमी), लाल कोशिका झिल्ली दोष (जैसे वंशानुगत spherocytosis, PNH), और हीमोग्लोबिनोपैथी सिकल सेल एनीमिया, थैलेसीमिया)] डीएटी नकारात्मक हैं।
ii। हेमोलिसिस (जैसे कि ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया, दवा प्रेरित हेमोलिसिस, हेमोलिटिक आधान प्रतिक्रियाओं) के प्रतिरक्षा कारण डीएटी पॉजिटिव हैं।
iii। अकेले सी 3 के कारण एक सकारात्मक डीएटी को ठंडे ऑटोएंटिबॉडीज, पेरोक्सिस्मल कोल्ड हीमोग्लोबिन्यूरिया और ड्रग प्रेरित हेमोलिटिक एनीमिया के कुछ मामलों में देखा जाता है।
2. अप्रत्यक्ष एग्लूटीनेशन टेस्ट (IAT) का उपयोग किसी मरीज के सीरम में RBC के खिलाफ अनबाउंड एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए किया जाता है।
मैं। मां के सीरम में एंटी-आरएच एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए IAT:
माता का सीरम आरएच पॉजिटिव ओ ब्लड ग्रुप आरबीसी के साथ जुड़ा हुआ है। यदि एंटी-आरएच एंटीबॉडी मां के सीरम में मौजूद हैं, तो एंटीबॉडी आरबीसी में बंध जाएंगे। RBC को तब धोया जाता है।
↓
फिर एंटी-ग्लोब्युलिन अभिकर्मक जोड़ा जाता है।
↓
यदि एंटी-आरएच एंटीबॉडी मां के सीरम में मौजूद हैं, तो आरबीसी को उत्तेजित किया जाएगा और परीक्षण आईएटी के लिए सकारात्मक है।
ii। रक्त चढ़ाने के दौरान दाता आरबीसी के खिलाफ एक प्राप्तकर्ता के सीरम में एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए IAT:
प्राप्तकर्ता में एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए प्राप्तकर्ता के सीरम के साथ दाता के आरबीसी के क्रॉस मिलान में IAT परीक्षण व्यापक रूप से (रक्त आधान से पहले) नियोजित किया जाता है, जो दाता के आरबीसी के साथ प्रतिक्रिया कर सकता है।
दाता के आरबीसी धो लें।
↓
प्राप्तकर्ता का सीरम आरबीसी में जोड़ें और 30 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर सेते हैं।
↓
आरबीसी धो लें।
↓
एंटी-ग्लोब्युलिन अभिकर्मक जोड़ें।
एग्लूटीनेशन का विकास इंगित करता है कि प्राप्तकर्ता के सीरम में दाता आरबीसी के खिलाफ एंटीबॉडी हैं और परीक्षण को एंटीबॉडी के लिए सकारात्मक के रूप में रिपोर्ट किया गया है। एक सकारात्मक IAT परिणाम इंगित करता है कि प्रस्तावित दाता रक्त को प्रश्न में प्राप्तकर्ता को स्थानांतरित नहीं किया जाना चाहिए।
मौजूदा एंटी-ग्लोब्युलिन परीक्षण अभिकर्मक (जिसे कॉम्ब्स की अभिकर्मक भी कहा जाता है) की तैयारी में मानव आईजीजी और सी 3 बी के खिलाफ निर्देशित मोनोक्लोनल एंटीबॉडीज का एक 'कॉकटेल' होता है (आरबीसी के लिए गैर-एग्लूटीटिंग एंटीबॉडीज का बंधन पूरक प्रणाली को सक्रिय करता है, जिसके परिणामस्वरूप C3b टुकड़ों के जमाव पर नियंत्रण होता है। आरबीसी (और इसलिए एंटीबॉडी के अलावा, आरबीसी सी 3 बी टुकड़ों के साथ भी लेपित हैं)।
