डीएनए प्रतिकृति अर्ध-रूढ़िवादी है - (प्रायोगिक प्रमाण)

कुछ प्रमुख प्रायोगिक प्रमाण जो डीएनए प्रतिकृति अर्ध-रूढ़िवादी हैं, वे इस प्रकार हैं: 1. मेसेलसन और स्टाल प्रयोग 2. टेलर का प्रयोग।

1. मेसल्सन और स्टाल प्रयोग:

मैथ्यू मेसल्सन और फ्रैंकलिन स्टाल (1957-58) द्वारा किए गए प्रयोग ने यह साबित कर दिया कि बरकरार रहने वाले ई। कोलाई कोशिकाओं में डीएनए को अर्ध-रूढ़िवादी तरीके से वॉटसन और क्रिक द्वारा पोस्ट किया गया है।

मेसल्सन और स्टाल (1958) ने सांस्कृतिक रूप से जीवाणु ई। कोलाई को ¹⁵ एन आइसोटोप ¹⁵ एनएच ₄ सीएल ( ¹⁵ एन भारी नाइट्रोजन का भारी आइसोटोप) से युक्त किया। ¹⁵ पी माध्यम में कई पीढ़ियों के लिए ई। कोलाई के डीएनए की प्रतिकृति के बाद, यह पाया गया कि डीएनए के दोनों किस्में ¹⁵ एन में प्यूरीन और पाइरिमिडाइन के घटक के रूप में शामिल थे।

यह भारी डीएनए अणु एक सीज़ियम क्लोराइड (CsCl) घनत्व ढाल में centrifugation द्वारा सामान्य डीएनए से अलग किया जा सकता है। ¹⁵ एन नहीं एक रेडियो आइसोटोपिक आइसोटोप होने के कारण, इसे ¹⁴ एन से केवल घनत्व पर आधारित किया जा सकता है।

जब ¹⁵ एन के साथ इन बैक्टीरिया को ¹⁴ एन ( ¹⁴ एनएच ₄ सीएल) वाले माध्यम में रखा गया था, तो यह देखा गया कि नवगठित डीएनए अणुओं में एक स्ट्रैंड भारी होता है जो दूसरे की तुलना में अधिक होता है। इस तरह के डीएनए को हाइब्रिड पाया गया क्योंकि एक स्ट्रैंड '^ एन (पुराना) से बना था और दूसरा ¹⁴ एन (नया) (चित्र। 6.22) से बना था।

20 मिनट (पहली पीढ़ी) के बाद डीएनए के घनत्व को मापने के लिए विभिन्न नमूने स्वतंत्र रूप से CsCl ग्रेडिएंट पर अलग किए गए थे। ई। कोलाई जीवाणु 20 मिनट में विभाजित होता है। सामान्य ¹⁴ एन माध्यम में दूसरे प्रतिकृति (40 मिनट के बाद) के दौरान दोनों किस्में फिर से अलग हो गईं (रेडियोधर्मी और गैर-रेडियोधर्मी ¹⁵ एन के साथ)।

यह देखा गया कि कुल चार डीएनए अणुओं में से दो का गठन पूरी तरह से गैर-रेडियोधर्मी था और शेष दो एक आधा रेडियोधर्मी और दूसरा आधा गैर-रेडियोधर्मी किनारा था।

2. टेलर का प्रयोग:

जेएच टेलर एट। अल। (1958) ने विकिया फैबा की जड़ टिप कोशिकाओं में डीएनए और गुणसूत्रों में प्रतिकृति के अर्ध-रूढ़िवादी मोड का भी प्रदर्शन किया। रेडियोधर्मी थाइमिडीन ³ एच को शामिल किए जाने के बाद, रूट युक्तियों को अनचाही माध्यम से कोलिसिन युक्त स्थानांतरित किया गया था।

रेडियोधर्मी गुणसूत्र (लेबल वाले डीएनए के साथ ³ एच) चांदी के अनाज के बिखरे हुए काले डॉट्स के रूप में दिखाई दिए। डीएनए के प्रतिकृति के बाद और तथ्यों के बाद गुणसूत्रों के गठन को देखा गया (चित्र। 6.23)।

(ए) यह पहली पीढ़ी में पाया गया था कि रेडियोधर्मिता समान रूप से दोनों गुणसूत्रों में वितरित की गई थी। ऐसे मामलों में डीएनए डबल हेलिक्स के मूल स्ट्रैंड को ³ एच के साथ लेबल किया गया था और नए बने स्ट्रैंड को गैर लेबल किया गया था।

(b) दूसरे विभाजन के दौरान केवल दो गुणसूत्रों में से एक ने एक स्ट्रैंड रेडियोधर्मी (मूल) और अन्य एक नॉनड्रायोडायक्टिव (नवगठित) दिखा कर रेडियोधर्मिता का प्रतिनिधित्व किया।

डीएनए के दोनों किस्में आरएनए संश्लेषण के लिए टेम्पलेट के रूप में कार्य क्यों नहीं करते हैं?

1. डीएनए के दोनों किस्में अलग-अलग अनुक्रम के साथ हैं। अलग-अलग अमीनो एसिड की उपस्थिति के कारण प्रोटीन इस प्रकार बनता है, अलग होगा।

2. एक डीएनए से दो अलग-अलग प्रोटीन के गठन के कारण आनुवंशिक जानकारी और हस्तांतरण तंत्र को जटिल करेगा।

3. यदि एक डीएनए अणु से RNA के दो स्ट्रैंड एक साथ बनते हैं, तो पूरक होने के कारण, RNA डबल स्ट्रैंड हो जाएगा। यह अनुवाद कदम को रोक देगा और प्रोटीन का गठन नहीं होगा। इस प्रकार, प्रोटीन संश्लेषण के लिए प्रतिलेखन कदम का कोई फायदा नहीं होगा।